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TIPO DE STEM CELLS |
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células madre pluripotentes inducidas (iPSC) a partir de pacientes con β-thal y
SCD que tienen mutaciones únicas de HBB |
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MÉTODO DE OBTENCIÓN |
· Obtención de células mononucleares de sangre
periférica (CMN) de dos pacientes mayores β-thal dependientes de transfusiones. · Cultivo de MNC · Reprogramación mediante
la expresión transitoria de vectores · se realiza tinción
fluorescente viva del marcador de pluripotencia TRA ‐ 1‐60 en las colonias
emergentes de iPSC. · Cultivo de líneas
establecidas de β-thal iPSC en el medio Essential 8. · Diferenciación de las
iPSC se realizó a través de cuerpos embrioides (EB. · Secuenciación de
genoma · CRISPR/Cas 9 · Inmunocitoquímica · PCR · Análisis cito métrico
de flujo · Western blot |
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VIA DE ADMINISTRACIÓN |
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RESULTADOS A
CORTO,MEDIANO Y LARGO PLAZO |
· En la primera
estrategia, necesitaremos generar HSPC trasplantables a partir de iPSC
corregidas genéticamente, que sean capaces de generar eritrocitos en la
médula a largo plazo y producir proteínas HBB funcionales en los eritrocitos
circulantes. · La segunda estrategia
es producir eritrocitos ex vivo a partir de iPSC humanas autólogas, y luego
infundir a pacientes que dependen de transfusiones. |
